PRUEBAS MOLECULARES PARA HIPERTENSIÓN ARTERIAL

El diagnóstico puede hacerse con el test de supresión con dexametasona o por la determinación de 18-hidroxicortisol por ELISA, que es más confiable para Aldosteronismo remediable con Glucocorticoides (GRA). La prueba por Southern Blot, permite detectar la presencia de una secuencia de ADN en una mezcla compleja de este ácido nucleico. Para ello, emplea la técnica de electroforesis en gel de agarosa con el fin de separar los fragmentos de ADN de acuerdo a su longitud y, después, una transferencia a una membrana en la cual se efectúa la hibridación de la sonda.

La Southern Blot es sensible y específico para (GRA) y debería realizarse en todo niño o adulto joven con HTA severa o resistente y una historia familiar positiva de HTA de inicio precoz o un accidente hemorrágico prematuro.

bibliografía:

http://soched.cl/alertas/comentario.asp?id_resumen=109

MECANISMOS MOLECULARES HIPERTENSION ARTERIAL

PCR EN HIPERTENSIÓN ARTERIAL

PCR EN HIPERTENSIÓN ARTERIAL

1.- Tema: Regiones polimórficas del gen 11ß-hidroxiesteroide 

deshidrogenasa tipo 1 (11ßHSD1) en hipertensión arterial 

esencial: Posible rol etiopatogénico

2.- Objetivo: Determinar la distribución y prevalencia de 

CA15, CA19 y INS A83557 en el HDS11B1 gen y 

correlacionar estos resultados con los parámetros bioquímicos 

en cortisol /ACTH (HPA) y el eje renina-angiotensina-

aldosterona en pacientes con hipertensión esencial

3.- Muestra: Sangre periférica

4.- Tipo de ácido nucleico: ADN genómico a partir de leucocitos de sangre periférica

5.- Extracción de ADN

 Lisis          ]Separación    ]        Kit comercial DNA-zolPurificación   ]

6.- Gen amplificado: HSD11B1

7.- PCR- Simple

Desnaturalización Inicial           94 C^o                    2min.

Desnaturalización                   94 C^o                30seg.]

Hibridación                          55C^o                 30seg ]        30 ciclos

Extensión                            72 C^o                30seg.]

Extensión final                      30 C^o                10min.

8.- Enzima de restricción: Xcml

9.- Visualización: EFO (Electroforesis)

BIBLIOGRAFÍA

http://www.scielo.cl/scielo.php?pid=s0034-98872008000600003&script=sci_arttext&tlng=en

Tamizaje y Prueba Confirmatoria

¿COMO SE DIAGNOSTICA LA HIPERTENSION ARTERIAL?

Para hacer el diagnóstico de HTA se utiliza un aparato llamado esfingomanómetro, y la determinación se hace, habitualmente en los brazos. Ante la sospecha, y para una mayor confirmación, hay que hacer varias determinaciones separadas en el tiempo. Lo que se recomienda es hacer como mínimo dos determinaciones separadas un minuto entre ellas en, por lo menos tres visitas, durante un periodo de tiempo de dos semanas a tres meses. Se considera que un paciente es hipertenso, si la media de todas y cada una de las determinaciones de TA están elevadas.

Disponible en: http://www.lasalud.com/pacientes/hipertension_arterial.htm#6 

Alteraciones en la Traducción

Tratándose de la HAS, algunos de los genes candidatos para ser estudiados son los que tienen relación contratándose de la HAS, algunos de los genes candidatos para ser estudiados son los que tienen relación con el sistema noradrenérgico, con el eje RAA, con las proteínas G de traducción transmembranal; la alfa–aducina, componente de citoesqueleto, que está involucrada en el contacto intercelular, en el transporte iónico transmembrana, la traducción de señales y el balance de sodio; y las proteínas que forman los canales iónicos, las bombas de cationes, los intercambiadores y los cotransportadores.  Además, deben tener importancia algunos genes que producen y modulan la respuesta inmune e inflamatoria, la rigidez arterial y la resistencia a la insulina, entre otros muchosel sistema noradrenérgico, con el eje RAA, con las proteínas G de traducción transmembranal; la alfa–aducina, componente de citoesqueleto, que está involucrada en el contacto intercelular, en el transporte iónico transmembrana, la traducción de señales y el balance de sodio; y las proteínas que forman los canales iónicos, las bombas de cationes, los intercambiadores y los cotransportadores.

 

Disponible: http://www.scielo.org.mx/scielo.php?pid=S1405-99402006000600023&script=sci_arttext

Aletraciones en la transcripción en la Hipertensión arterial

El gen del angiotensinógeno (AGT) está genéticamente relacionado con la HTA. Estudios realizados han indicado que un cambio de una guanina por adenina en la posición –6 de la región promotora del gen AGT, afectaba el promedio de transcripción basal del gen y estaba asociado significativamente con la presencia de hipertensión, otros  determinaron que la presencia de diferencias en las secuencia en la región central del promotor, alteraban la afinidad del promotor por factores de transcripción. Las variantes genéticas en la posición -20 y -18 podían afectar la actividad transcripcional hasta 2,5 veces. En un estudio realizado a varios pacientes se explicó que es posible que exista un aumento de la transcripción del gen NR3C2 cuando hay un número de repeticiones AGAT distinto al habitual en el intrón 2 del gen, por lo que habría mayor número de receptores de mineralocorticoides para activar la transcripción de genes tales como el del canal de Na y a bomba Na-K ATPasa. El aumento contribuiría al aumento de la reabsorción de Na y agua, y explicaría la caída en los niveles de ARP (actividad renina plasmática) como mecanismo de respuesta fisiológica al aumento de la volemia y presión arterial.

En casos de hiperaldosteronismo primario (HAP), el aumento de aldosterona induce una mayor activación de este receptor lo que genera retención de sal y, con ello, elevación de la presión arterial⁵. En casos de síndrome de exceso aparente de mineralocorticoides (AME), también se produce una mayor activación del MR debido a defectos en la enzima 11ß-hidroxiesteroide deshidrogenasa (11ßHSD2)⁶. Esta enzima es la encargada de inactivar el cortisol convirtiéndolo a cortisona. El cortisol tiene la misma afinidad por el MR que la aldosterona, sin embargo está 1.000 veces más concentrado en el plasma por lo que es necesario que se inactive para que no actúe sobre el MR^2,7. En el caso de los pacientes que tienen defectos en la 11ßHSD2 el cortisol activa al receptor del MR produciendo aumento de la presión arterial. Asimismo, se ha encontrado una mutación activante (S810L) en el gen del MR (NR3C2; GI: 37540362) que produce hipertensión arterial en las personas que la poseen mediante el mismo mecanismo descrito más arriba.

 

Referencias Bibliográficas:

 http://www.scielo.cl/scielo.php?pid=S0034-98872005001200002&script=sci_arttext
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23648704
http://www.bvs.sld.cu/revistas/ibi/vol32_1_13/ibi02113.htm